Как выбрать правильную колонку?

? ? ? ? ? ? ? ?

Date:2021-11-04 17:32:46 Thursday

Summary: ① Матрица упаковки хроматографической колонки A. Матрица из силикагеля: высокая чистота, низкая стоимость, высокая прочность, легкая химическая модификация, но диапазон pH ограничен. Большинство наполнителей кремнеземной матрицы стабильны в ди......

① Матрица упаковки хроматографической колонки
A. Матрица из силикагеля: высокая чистота, низкая стоимость, высокая прочность, легкая химическая модификация, но диапазон pH ограничен. Большинство наполнителей кремнеземной матрицы стабильны в диапазоне pH 2-8, но специально модифицированная фаза, связанная с силикагелем, может быть стабилизирована при pH 1,5-10.
B. Полимерная матрица: широкий диапазон pH, стабильная температура (высокая температура может достигать более 80 градусов) и низкая механическая прочность.
② Форма частиц
Большинство современных наполнителей для ВЭЖХ представляют собой сферические частицы, но иногда и частицы неправильной формы. Сферические частицы обеспечивают более низкое давление в колонке, более высокую эффективность и стабильность колонки, а также более длительный срок службы колонки. При использовании высоковязкой активной фазы; частицы неправильной формы имеют большую удельную поверхность и относительно низкую цену.
③ Размер частиц
Чем меньше размер частиц, тем выше эффективность и выше разрешение, но в то же время это приведет к большему перепаду давления в колонке. Выберите упаковочный материал 1,5-3 мкм для обработки некоторых сложных образцов, UPLC может использовать упаковку 1,5 мкм; другая насадка с размером частиц 10 мкм или более используется в качестве полупрепаративной или препаративной колонки.
④Содержание углерода
Содержание углерода в хроматографической колонке относится к соотношению связанной фазы на поверхности силикагеля, которое зависит от удельной площади поверхности и степени связывания. Высокое содержание углерода улучшает емкость колонки, разрешение и время анализа и используется для сложных проб, требующих высокого разрешения; с низким содержанием углерода имеет короткое время анализа и проявляет различную селективность, используется для экспресс-анализа простых проб и активных фаз с высоким содержанием воды. Образцы состояния. Как правило, содержание углерода C18 колеблется в пределах 7-19%.
⑤ Размер пор и удельная поверхность
Адсорбционная среда ВЭЖХ представляет собой пористые частицы, и большая часть реакционной поверхности находится в порах. Следовательно, молекулы должны войти в поры, чтобы быть адсорбированными и разделенными.
Размер пор хроматографической колонки и удельная площадь поверхности являются двумя взаимодополняющими понятиями. Размер пор мал, а удельная поверхность велика, и наоборот. Большая удельная поверхность, увеличение реакции между образцом и связанной фазой, увеличение хранения, загрузки образца и разделения сложных компонентов; малая удельная поверхность, быстрое время уравновешивания, подходит для градиентного анализа.
⑥ Объем пор и механическая прочность
объем пор, также известный как «объем пор». Относится к размеру объема пустот на частицу. Он может хорошо отражать механическую прочность наполнителя. Наполнители с большим объемом пор имеют несколько меньшую механическую прочность, чем наполнители с малым объемом пор. Наполнители с объемом пор 1,5 мл/г или меньше в основном используются для ВЭЖХ-разделения, в то время как наполнители с объемом пор более 1,5 мл/г используются для эксклюзионной хроматографии и хроматографии низкого давления.
⑦ заглушка
Закрытие конца колонки может уменьшить хвостовые пики полярных основных соединений из-за взаимодействия с открытыми силанольными группами. Незаблокированная связанная фаза будет иметь другую селективность по сравнению с заблокированной связанной фазой, особенно для полярных образцов.